Isolasi dan Uji Potensi L-Asparaginase dari Rimpang Kunyit Putih (Curcuma mangga Vall) terhadap Leukimia Tipe K562

*Agustina Arpintasari  -  Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Indonesia
Wuryanti Wuryanti  -  Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Indonesia
Wasino Hadi Rahmanto scopus  -  Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Indonesia
Published: 1 Dec 2008.
Open Access Copyright 2008 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi
License URL: http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/

Citation Format:
Abstract
Telah dilakukan penelitian tentang isolasi enzim L-asparaginase yang berasal dari kunyit putih (Curcuma mangga Vall) dan uji aktifitas pada leukimia tipe K562. L-asparaginase adalah enzim hidrolase yang mengkatalisis hidrolisis asparagin menjadi asam aspartat dan amonia. Penelitian ini dilakukan melalui beberapa tahapan utama yaitu isolasi enzim, uji aktivitas dan uji potensi antikanker. Isolasi L-asparaginase melalui dua tahap yaitu ekstraksi dan fraksinasi bertingkat menggunakan garam amonium sulfat sehingga akan dihasilkan enzim L-asparaginase yang murni dari protein. Uji aktivitas spesifik L-asparaginase dilakukan pada kondisi optimum yaitu pada suhu 37 0C, pH 8,5, dan waktu inkubasi 30 menit dengan cara menghitung jumlah amonia yang terbentuk dengan pereaksi Nessler dan menghitung kadar protein dengan metode Lowry dari masing-masing fraksi. Dari hasil penelitian diperoleh L-asparaginase dari rimpang kunyit putih (Curcuma mangga Vall) dengan aktivitas spesifik yang besar bila dibandingkan dari sumber yang lain seperti benalu, bawang merah, bawang putih dan bawang bombay. Aktivitas spesifik enzim L-asparaginase kunyit putih sebesar 2195,715 unit/mg protein pada fraksi kelima (80-100%). Tahapan yang ketiga yaitu uji potensi antikanker pada kultur sel Leukimia tipe K562 dengan menggunakan metode viabilitas sel dengan penambahan MTT dan diukur dengan ELISA Reader. Pengujian dilakukan dengan 15 variasi konsentrasi dan diketahui bahwa enzim L-asparaginase mempunyai potensi yang baik sebagai antikanker dengan nilai LC50 pada konsentrasi penambahan L-asparaginase sebesar 9,419 ppm.
Keywords: Antikanker; L-asparaginase; Aktivitas spesifik; LC50

Article Metrics:

  1. G.S. Nafrialdi, D. Tirza, T. Handoko, Antikanker dan imunosupresan, Setiabudi R, Suyatma FD, Purwantyastuti, editors. Farmakologi dan terapi. Jakarta: Gaya Baru, (2003) 686-713
  2. M. Radji, A. Sumiati, N. Indani, Uji Mutagenisitas dan Anti Kanker Ekstrak Aseton dan N-Heksana Dari Kulit Batang Sesoot (Garcinia picrorrhiza Miq.), MajaIah lmu Kefarmasian, 1 (2004) 69-78
  3. P. Konečná, B. Klejdus, H. Hrstková, Monitoring The Asparaginase Levels in Children with Acute Lymphoblastic Leukaemia Treated with Different Asparaginase Preparations, Scripta Medica, (2004) 55-62
  4. A.L. Lehninger, Dasar-dasar biokimia, Erlangga, Jakarta, 2000
  5. E.F.D. Kurniasih, Isolasi, Karakterisasi dan Uji Aktivitas Spesifik L Asparginase Dalam Variasi Waktu Penyimpanan Dari Kunyit Putih (Curcuma mangga Vall) Pada Suhu Kamar, in: Jurusan Kimia, Universitas Diponegoro, Semarang, 2006
  6. Q.-L. Guo, M.-S. Wu, Z. Chen, Comparison of antitumor effect of recombinant L-asparaginase with wild type one in vitro and in vivo, Acta Pharmacologica Sinica, 23 (2002) 946-951
  7. B.N. Meyer, N.R. Ferrigni, J.E. Putnam, L.B. Jacobsen, D.E. Nochols, J.L. Mc Laughlin, Brine Shrimp: A Convinient General Bioassay for Active Plant Convinient, Planta Medica, 45 (1982)
  8. R.K. Scopes, Protein Purification: Principles and Practice, 3rd edition ed., Srpinger, Newyork, 1987
  9. F. Franks, Characterization of Proteins, Humana Press, 2007
  10. J. Paul, Isolation and characterization of a Chlamydomonas L-asparaginase, Biochemical Journal, 203 (1982) 109-115
  11. R.I. Freshney, Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Aplication, Lissing, Newyork, 1986
  12. D. Hughes, H. Mehmet, Cell proliferation and apoptosis, Taylor & Francis, 2003
  13. T. Mosmann, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays, Journal of immunological methods, 65 (1983) 55-63

Last update: 2021-05-17 11:17:23

  1. Purification, characterization and anticancer potential tests of L-asparaginase enzyme from the leaves siam weed (Chromolaena odorata Linn)

    N Khaerah, A Ahmad, Yusriadi, R A Arfah, A Karim. Journal of Physics: Conference Series, 127 , 2019. doi: 10.1088/1742-6596/1341/3/032018

Last update: 2021-05-17 11:17:23

No citation recorded.